【新品速递】Cisbio 药物靶标胞外激酶(Kinase)活性检测整体解决方案

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【新品速递】Cisbio 药物靶标胞外激酶(Kinase)活性检测整体解决方案

来源:作者:人气:-发表时间:2019-07-01 14:12:00【
什么是激酶?
激酶(kinase)是一种特殊的酶,可以将磷酸基团从高能量供体分子(如ATP)转移到特定靶分子(底物),这一过程称为磷酸化。许多肿瘤的发生是由某些与生长相关的“激酶”发生突变导致异常活化引起的,因而激酶抑制剂如能有效抑制突变激酶的活性,就能达到抑制癌细胞增长的目的。
激酶研究的意义:
激酶(Kinase)是最重要和超大的家族药物靶标,包含518个成员,是制药工业和学术研究的主要研究领域。激酶信号传导途径在调节细胞增殖、代谢和死亡中起着重要作用,因此激酶活性的变化可能会导致包括癌症在内的各种疾病形态。因而,激酶的上述重要特征使其成为药物筛选和发现中最重要的目标家族之一。在过去几年中,科研人员不断地增加激酶作为重要药物的识别靶标。截至目前,FDA已经批准了超过30种激酶抑制剂。现代新药研发的关键首先是寻找、确定和制备药物作用靶点。在500多个已发现的药物靶点里中,GPCR,Ion Channel,Kinase的使用最为广泛。
为了支持激酶类药物的筛选、发现与开发,西宝生物携手Cisbio为您提供多种激酶类型,从检测方法优选、高通量筛选到选择性分析等一系列激酶研究解决方案。咨询订购热线:400-021-8158!
Cisbio 激酶检测,是基于抗体的检测产物生成的解决方案,其特异性各不相同。包括基于 ADP 定 量的适用于所有激酶的 ADP Transcreener 检测试剂盒;利用通用底物的经过两百多种激酶验证 的 KinEASE 试剂盒;利用特定底物、特异抗体的 HTRF 工具箱解决方案。
Cisbio激酶检测原理:
Cisbio 激酶检测,是基于抗体的检测产物生成的解决方案,其特异性各不相同。包括基于ADP定量的适用于所有激酶的 ADP Transcreener 检测试剂盒;利用通用底物的经过两百多种激酶验证的 KinEASE 试剂盒;利用特定底物、特异抗体的HTRF工具箱解决方案。关于HTRF技术的介绍请参阅
图1:HTRF磷酸化蛋白测量的实验过程
所有这些检测方案,操作步骤都是一致的。
(1)激酶反应:加入激酶、底物、ATP,室温进行激 酶反应;
(2)检测步骤:激酶反应完毕,加入能量供体 Eu 和能量受体 XL665/d2 标记试剂,室温孵育1小时,读数。
激酶检测试验步骤:
所有的检测方案,操作步骤都是一致的。
(1)激酶反应:加入激酶、底物、ATP,室温进行激 酶反应;
(2)检测步骤:激酶反应完毕,加入能量供体Eu和能量受体XL665/d2标记试剂,室温孵育1小时,读数。
KinEASE TK 试剂盒:
KinEASE TK试剂盒适用于所有酪氨酸激酶的检测。试剂盒提供生物素标记的底物、Eu标记的磷 酸化位点特异性抗体、XL665标记的亲和素以及缓冲液。激酶将底物磷酸化,Eu-Ab识别磷酸化底物,XL665-SA与底物上的生物素结合。Eu与XL665接近,产生HTRF信号。
经过验证的激酶列表:
Ab1
ABL2
Arg
BIK
BInx
BRK
BTK
c-kit
CSF1R
CSK
C-SRC
DDR2
EGFR
EphA3
EphA4
EphA5
EphA8
EphB1
EphB2
EphB3
EphB4
ErbB4
FAK
Fer
Fes
FGFR1
FGFR2
FGFR3
FGFR4
Fgr
FIt1
FIt3
FIt4
Fms
Fps
FRK
Fyn
Hck
IGF-1R
INSRR
InsulinR
IRR
ITK
JAK2
JAK3
KDR
Kit
LCK
Lyn
Mer
Met
MAT1R
Musk
NTRK1
NTRK2
PDGFRβ
PYK2
PYK2
PTK5
PTK6
Ret
Ron
Ros
Rse
Src
TEK
Tie2
TRKA
TRKB
TYRO3
VEGFR1
VEGFR2
VEGFR3
Yes
ZAP-70
 
 
 
 
 
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产品订购信息:
产品名称
产品规格
产品 货 号
HTRF KinEASE-TK kit
1,000 tests
62TK0PEB
20,000 tests
62TK0PEC
TK Substrate-biotin
50ug
61TK0BLE
500ug
61TK0BLC
KinEASE STK 试剂盒:
KinEASE STK试剂盒是用来进行丝氨酸/苏氨酸激酶检测的试剂盒。根据激酶的不同,该试剂盒有三个通用底物可供选择,分别为S1、S2和S3,经过验证的激酶有一百多种。对于没有经过验证的激酶,可以用Discovery 试剂盒确定合适的底物,其中包括了三种底物。试剂盒的检测原理与实验步骤与KinEASE TK试剂盒相同。
经过验证的激酶列表:
HTRF KinEASE STK S1
AMPK
BrSKF2
CaMKI
CaMKIIa
CaMKIIβ
CaMKIIσ
CaMKIIγ
CaMKIV
CHEK1
CHEK2
CHK1
CHK2
DAPK1
DAPK2
DAPK3
DCAMKL2
DRAK1
LKB1
MAPKAP-K1α
MAPKAP-K1β
MAPKAP-K2
MAPKAP-K3
MAPKAPK5
MELK
MLCK
Mnk2
PASK
PHK γ2
PKC α
PKC βI
PKC βII
PKC σ
PKC ε
PKC γ
PKC ι
PKC μ
PKC τ
PKC ζ
PKD2
PRAK
PRK2
PRKA
PRKD2
PRKG2
PRS6KA2
RsK1
RsK2
STK22B
STK22D
ZIRK
 
 
 
 
 
 
HTRF KinEASE STK S2
Aurora A
Aurora B
MARK2
NEK11
PAK2
PAK3
PAK4
PAK5
PAK6
PAR-1Bα
PKA
PKG1α
PKG1β
PRKACA
ROCK-I
ROCK-II
ROKα
RPS6KA6
Rsk4
STK6
TBK1
 
 
 
HTRF KinEASE STK S3
AKT1
AKT2
AKT3
AKT5
ASK1
Aurora C
BRSK1
CDC42BPA
CDC42BPB
Clk 3
COT
DMPK
DYRK2
GRK5
GRK6
GSK3α
GSK3β
HIPK2
HIPK3
IKKα
IKKβ
LOK
MAP3K8
MARK1
MINK
MINK1
MRCKα
MRCKβ
MSK1
MSK2
MSSK1
MST1
MST2
NEK2
NEK3
NEK6
NEK7
NLK
P70S6K
Pim-1
Pim-2
PKBα
PKBβ
PKBγ
PLK 3
RPS6KA4
RPS6KA5
RPS6KB1
SAD1
SGK1
SGK2
SGK3
SGKL
SIK
Snk
STK23
STK3
STK33
STK4
WNK2
WNK3
 
 
 
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产品订购信息:
产品名称
产品规格
产品货号
HTRF KinEASE -STK S1 kit
1,000 tests
62ST1PEB
20,000 tests
62ST1PEC
HTRF KinEASE -STK S2 kit
1,000 tests
62ST2PEB
20,000 tests
62ST2PEC
HTRF KinEASE -STK S3 kit
1,000 tests
62ST3PEB
20,000 tests
62ST3PEC
HTRF KinEASE STK Discovery kit
1,000 tests
62ST0PEB
其他产品
HTRF KinEASE detection buffer
40ml
62SDBRDD
200ml
62SDBRDF
STK-Substrate 1-biotin
50ug
61ST1BLE
500ug
61ST1BLC
STK-Substrate 2-biotin
50ug
61ST2BLE
500ug
61ST2BLC
STK-Substrate 3-biotin
50ug
61ST3BLE
500ug
61ST3BLC
Enzymatic buffer kinase 5X
10ml
62EZBFDC
50ml
62EZBFDD
HTRF 工具箱特定激酶解决方案:
如果您希望用特定的底物、特异的抗体进行激酶检测,HTRF工具箱试剂为您提供了多种选择。我们提供二十多种Eu标记的特异性抗体和与之配合使用的能量受体,包括XL665或者d2标记的链霉亲和素,抗6HIS抗体,抗GST抗体等。实验检测的是磷酸化产物的生成,最终的实验信号跟底物磷酸化的程度成正比。
HTRF 工具箱方案实例
进行COT激酶的检测,其底物为MEK1,产物为磷酸化MEK1。我们选择Biotin-MEK1蛋白作底物,利用标记了Eu3+的抗磷酸化MEK1抗体和标记了XL665 ad 的链霉亲和素组成一个反应体系,如右图所示。该反应体系与KinEASE试剂盒是相似的,只是底物与Eu标记抗体是针对COT激酶的,比较特异。

图为:用工具箱进行COT激酶检测
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